CD45 y leucemia linfoide aguda pedi√°trica

Introducción: El CD45 se expresa en las células hematopoyéticas, su determinación es indispensable para la clasificación inmunofenotípica de la leucemia linfoide aguda (LLA).

Objetivo: Evaluar la expresi√≥n del ant√≠geno CD45 en los blastos de pacientes pedi√°tricos con LLA y su relaci√≥n con las caracter√≠sticas biol√≥gicas, morfol√≥gicas y cl√≠nicas al inicio de la enfermedad, la respuesta al tratamiento y la supervivencia global (SG) de los enfermos. Material y m√©todo: Se estudiaron 160 pacientes con LLA entre diciembre del 2012 y diciembre del 2017, tratados con el protocolo ALL-IC BFM-SG 2009. El inmunofenotipaje celular de la m√©dula √≥sea se realiz√≥ por citometr√≠a de flujo. Resultados: El fenotipo B CD45+ predomin√≥ en los menores de seis a√Īos de edad y en los mayores de diez, el fenotipo T CD45+. Se encontr√≥ diferencia significativa entre la ausencia de adenopat√≠as mediast√≠nicas, el fenotipo leuc√©mico y la ausencia de CD45 (p=0.004); entre la respuesta a la prednisona en sangre perif√©rica al d√≠a ocho, el fenotipo ¬†leuc√©mico y la ausencia de CD45 (p=0.001). Se encontraron diferencias significativas entre la respuesta a la prednisona en sangre perif√©rica el d√≠a ocho y la respuesta en m√©dula √≥sea el d√≠a 33, seg√ļn fenotipo leuc√©mico (p=0.009) y la presencia en los blastos del ant√≠geno CD45 (p=0.02). Se encontr√≥ diferencia significativa entre la SG de los enfermos, seg√ļn fenotipo leuc√©mico y la ausencia del ant√≠geno CD45 (p=0.017). Conclusi√≥n: La expresi√≥n o ausencia del ant√≠geno de CD45 en los blastos tiene relaci√≥n con la respuesta al tratamiento y la SG de pacientes pedi√°tricos con LLA.

Vianed Marsán Suárez, Consuelo Milagros Macías Abraham, Gabriela Díaz Domínguez, Yenisey Triana Marrero, Rosa María Lam Díaz, Sergio Machín García, Martha Beatriz García Caraballoso, César Valdés Sojo, Orestes Cháguez Leyva.
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Expresión del antígeno CD45 en la Leucemia Linfoide aguda Pediátrica

Introducción: La leucemia linfoide aguda (LLA) es la neoplasia más frecuente en la infancia. La determinación del antígeno CD45 discrimina entre los blastos y las células reactivas en la médula ósea (MO).
Objetivo: Evaluar la expresi√≥n del ant√≠geno CD45 sobre los blastos de pacientes con LLA, seg√ļn los distintos subtipos inmunol√≥gicos, su posible relaci√≥n con las caracter√≠sticas biol√≥gicas y cl√≠nicas de presentaci√≥n de la enfermedad y la respuesta al tratamiento antileuc√©mico.
Método: Se estudiaron 150 pacientes con LLA procedentes de varios servicios oncohematológicos del país, entre enero del 2008 y mayo del 2015. El inmunofenotipaje celular de la MO se realizó por citometría de flujo.
Resultados: El ant√≠geno CD45 mostr√≥ una gran heterogeneidad de expresi√≥n sobre los linfoblastos. Del total de enfermos estudiados, 19,3 % no expresaron sobre los blastos el ant√≠geno CD45, 36,7 % presentaron una expresi√≥n moderada y 44 % mostraron una alta densidad de expresi√≥n. Se encontr√≥ diferencia significativa al comparar el fenotipo leuc√©mico con la expresi√≥n del ant√≠geno CD45 sobre los blastos (p = 0,000). Ning√ļn enfermo present√≥ adenopat√≠as mediastinales, con diferencias significativas (p = 0,000), seg√ļn el fenotipo y la expresi√≥n de CD45. Los pacientes con LLA-T cuyos blastos no expresaron CD45 tuvieron una mala respuesta al tratamiento anti-leuc√©mico los d√≠as 8 y 15 en sangre perif√©rica y MO, respectivamente.
Conclusi√≥n: La expresi√≥n de CD45 sobre los blastos, pudiera ser considerada como un factor pron√≥stico adicional para la estratificaci√≥n en diferentes grupos de riesgos, de la LLA en el ni√Īo.

Vianed Marsán Suárez, Consuelo Macías Abraham, Gabriela Díaz Domínguez, Yaimara Morales Garrido, Rosa María Lam Díaz, Sergio Machín García, Alejandro González Otero, Raquel Fernández Nodarse, Tamara Cedré Hernández, César Valdés Sojo
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Introducción del genotipaje molecular de los antigenos plaquetarios

Introducci√≥n: Los ant√≠genos plaquetarios humanos (HPA) se expresan en 6 glucoprote√≠nas plaquetarias diferentes. Se ha descritoque estos ant√≠genos pueden estimular la producci√≥n de aloanticuerpos una vez expuestos a plaquetas humanas con diferentes HPA, lo que provocacomplicaciones cl√≠nicas como la trombocitopenia neonatal aloinmune y la p√ļrpura postransfusional. Materiales y m√©todos: Se realiz√≥ el estudio a 11 muestras de pacientes en espera de trasplante renal de genotipo de los ant√≠genos HPA-1,2,3 a/b mediante PCR multiplex, mientras que para el estudio de genotipo de los ant√≠genos HPA-5a/b se utiliz√≥ la t√©cnica de PCR con secuencia espec√≠fica de primer. Los productos de ADN amplificados fueron visualizados mediante electroforesis en gel de agarosa y electroforesis capilar. Resultados:El an√°lisis de los fragmentos de ADN amplificados revelaron resultados similares por ambos m√©todos. Para los ant√≠genos HPA-1,-2, el 63 % de las muestras fueron homocig√≥ticas para el fenotipo (a) mientras que se observ√≥ heterocigocidad en todos los casos para el genotipo HPA-3. En el sistema HPA-5, el 54 % fueron homocig√≥ticas para el fenotipo (a) y el 46 %, heterocig√≥ticas. Para el genotipo del HPA-15, el 4 % fueron homocig√≥ticas para el fenotipo (b) mientras que el 96 % resultaron ser heterocig√≥ticas. Conclusiones: Estos resultados muestran similitudes para los genotipos HPA 1, 2,3 a/b, HPA 5a/b y HPA15 a/brespecto a lo planteado en la literatura.

Yisenia Romero Díaz, Gilberto Soler Noda, Antonio Bencomo Hernández
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Procedencia y fenotipo del sistema Rh en donantes negativos en un Hemocentro colombiano

Introducción: El sistema Rh está compuesto por más de 56 antígenos capaces de producir enfermedad hemolítica, definidos por métodos serológicos. Los más importantes y, por ello denominados antígenos mayores del sistema, son los antígenos D, C, c, E y e. Estos antígenos se ubican sobre dos proteínas que se expresan en la membrana de los eritrocitos Rh D y Rh CE. Objetivo: Determinar la frecuencia de los antígenos C, c, E y e del sistema Rh en donantes de sangre Rh negativos del Hemocentro Centro Oriente Colombiano. Metodología: Estudio descriptivo de corte transversal que incluyó 193 donantes voluntarios de sangre del Hemocentro Centro Oriente Colombiano, la fenotipificación de los antígenos del sistema Rh se realizó utilizando la técnica en tarjeta gel. Se calculó la frecuencia fenotípica de los antígenos del sistema Rh, en porcentajes y para el procesamiento de la información se utilizó el paquete estadístico SPSS versión 21.0 donde se realizó el análisis de los datos de la población.  Como criterios de inclusión ser donante voluntario de sangre y de exclusión, estar hemoclasificado como antígeno DEL, D débil y D parcial. Resultados: Las muestras analizadas fueron obtenidas de la tubuladura central de la unidad fraccionada de glóbulos rojos, identificándose tres fenotipos con la siguiente frecuencia: cde/cde (95.86 %), cde/cdE (3.10 %) y cde/Cde (1.04 %). Los participantes del estudio provenían de diversos municipios del departamento de Boyacá y otras regiones del país como llanos Orientales, Santander y Cundinamarca. Los antígenos del sistema Rh son altamente polimórficos a nivel de poblaciones, dada la importancia inmunológica de los antígenos del sistema Rh, los cuales se ven directamente relacionados con el desarrollo de anemia hemolítica postransfusional y perinatal, la fenotipificación ampliada brinda mayor seguridad transfusional y seguimiento al estado del feto o neonato.

Shirley Gigiola Cruz Rubio, Maritza Angarita Mercán, María Fernanda Torres García, Pilar Andrea Báez Díaz
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Diagnóstico por citometría de flujo de la hemoglobinuria paroxística nocturna.

Introducci√≥n: La hemoglobinuria parox√≠stica (HPN) nocturna es una enfermedad clonal, adquirida y no maligna de la c√©lula madre hematopoy√©tica. En este padecimiento se encuentra afectado el anclaje a la membrana celular de mol√©culas como el CD55 y CD59, fundamentales en la regulaci√≥n de la lisis mediada por el complemento. Por su elevada especificidad y sensibilidad, la citometr√≠a de flujo ¬†multiparam√©trica (CFM) es el m√©todo de elecci√≥n para el diagn√≥stico de esta enfermedad. Objetivo: Establecer un algoritmo diagn√≥stico de la HPN por CMF. Material y M√©todo: Se analiz√≥ una muestra de sangre perif√©rica para CFM de un paciente con sospecha de HPN. El inmunofenotipaje celular se realiz√≥ con un panel de anticuerpos monoclonales dirigidos contra los ant√≠genos que se expresan en la membrana citoplasm√°tica mediante su anclaje al glicosilfosfatidilinositol. Las muestras se leyeron en un cit√≥metro GALLIOS, Beckman Coulter y los datos obtenidos se analizaron con el empleo del programa inform√°tico Kaluza. Resultados: Se identificaron cuatro clones HPN. En los granulocitos se observ√≥ un clon HPN de aproximadamente 90 %, con deficiencia en la expresi√≥n de CD16, CD24, CD55 y CD59. En los monocitos se observaron dos clones: (1) clon CD14_CD59_ y (2) clon CD14_CD59+ con tama√Īos clonales de 59,77 % y 19,45 %, respectivamente. En los eritrocitos se identific√≥ un clon de 19,98 % y de determin√≥ el grado de afectaci√≥n. Conclusiones: El algoritmo de an√°lisis propuesto permite identificar las poblaciones celulares con clones HPN. Adem√°s, dichos clones pueden ser cuantificados en cuanto a tama√Īo clonal y expresividad de los ant√≠genos dependientes de anclaje a glicosilfosfatidilinositol. Con la CFM se logra determinar con elevada sensibilidad el grado de afectaci√≥n de los eritrocitos en la expresi√≥n de CD59 como medida directa de la susceptibilidad que experimentan a la lisis por el complemento.

Gabriela Díaz Domínguez, Vianed Marsán suárez, Amanda Sánchez Ballester
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INFECCI√ďN POR VIRUS DE HEPATITIS B Y C EN PACIENTES HEMODIALIZADOS
D La Rosa-Hern√°ndez
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Presencia del antígeno HLA B*07 en pacientes con sospecha de artropatías
Odalis M de la Guardia Pe√Īa, Lelyem Marcell Rodr√≠guez
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